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鼓風箱適用于蛋白薄膜的構象轉變

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2021-06-21 09:09【

      傅立葉自解卷積是一種解析光譜重疊譜帶的有效方法,可 以提高重合譜帶的分辨率,可用于對基礎成分進行半定量分 析。紅外光譜是評估絲素蛋白二級結構變化的基本方法。 其中,酰胺 I( 1600~ 1700 cm-1 ) 區(qū)由與各種次級結構相對應的 分量重疊而成,這些次級結構包括無規(guī)卷曲( random coil) 、α- 螺旋( α-h(huán)elix) 、β-折疊( β-sheet) 和 β-轉角( β-turns) ,對該 振動帶進行退卷積和基線校正,再進行分峰和擬合,可以量化 絲素蛋白薄膜中各種二級結構成分的貢獻。YK-RO-B 型實驗室超純水機,寧波丹斯博頓環(huán)??萍钾? 任有限公司; YX-18LM 型手提式壓力蒸汽滅菌鍋,江陰濱江 醫(yī)療設備有限公司; 85-1 型磁力攪拌器,上海梅穎浦儀器儀表 制造有限公司; H1850 型離心機,湖南湘儀實驗室儀器開發(fā)有 限公司; DHG-9036A 型電熱恒溫鼓風干燥箱,上海精宏實驗 設備有限公司; 配有衰減全反射附件的傅立葉變換紅外光譜 儀,PerkinElmer Spectrum Frontier。

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    為了對絲素蛋白薄膜中的不同構象進行指認和半定量分 析,本文使用紅外光譜儀自帶軟件,并采用 9 點 法對退卷積譜線求取。再使用 PeakFit 4. 2 軟件對不同退卷積譜線執(zhí)行,設置 半峰寬為 32. 83,直到迭代次數(shù)減小到不再變化為止。研究發(fā) 現(xiàn),高斯模型 Gauss Amp 的擬合效果同 Gauss Area,均較好, 相關性也等同; 而使用其他擬合方程則面臨無法降低迭代次數(shù) 或相關性較低等問題,不適用于分析本文結晶度較低的絲素蛋 白薄膜。因此,本實驗選用 Gauss Amp 擬合方程對所有譜線進 行擬合。一般,二階導數(shù)用于驗證擬合峰的位置,擬合峰數(shù)目,擬合峰數(shù)目大于等于退卷積峰的數(shù)目。所有譜線采取完全相同的退卷積、二階導或擬合參數(shù)。