棕櫚油酸是一種十六碳的單不飽和脂肪酸 ( MUFA) ，雙鍵位于第 7 個(gè)碳原子上，具有較好的穩(wěn) 定性。研究表明，棕櫚油酸能夠改善皮膚的持水 性和彈性，提高人體的免疫力。近年來，研究發(fā)現(xiàn)棕 櫚油酸對(duì)一些慢性疾病如代謝綜合征、糖尿病和炎 癥等具有治療作用，從而引起人們廣泛關(guān)注。

1 材料與方法 

1． 1 試驗(yàn)材料 

1． 1． 1 原料與試劑 

壓榨沙棘果油，艾康生物技術(shù)有限公司。95% 乙醇、尿素、無水硫酸鈉、氫氧化鉀、鹽酸、石油醚 ( 沸程 60 ～ 90 ℃ ) ，分析純; 正己烷，色譜純; 其他化 學(xué)試劑均為分析純。 

1． 1． 2 儀器與設(shè)備 

ML104 /02 電子天平、FE20 型 pH 計(jì)，梅特勒 － 托 利多儀器( 上海) 有限公司; X3 管式離心機(jī)、揮發(fā)性物 質(zhì)精餾濃縮裝置，賽默飛世爾科技公司; Ｒ06 B2 旋轉(zhuǎn) 蒸發(fā)儀，上海申生科技有限公司; DK-S22 型電熱恒 溫水 浴 鍋，上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備 有限公司; Agilent 7890A 型氣相色譜儀，美國安捷倫科技有限公司。 

1． 2 試驗(yàn)方法 

1． 2． 1 沙棘果油混合脂肪酸的制備 

向燒瓶 中 加 入 112 g 氫 氧 化 鉀 和 95% 乙 醇 1 200 mL，在 80 ℃的水浴下攪拌回流至氫氧化鉀完 全溶解后加入 120 g 沙棘果油，攪拌回流 2 h。將反 應(yīng)液冷卻至室溫后加入 400 mL 去離子水、400 mL 正己烷混合均勻后轉(zhuǎn)移至分液漏斗中。取下層，使 用濃鹽酸調(diào) pH 至 2 ～ 3，再加入適量正己烷進(jìn)行萃 取，萃取液加入適量無水硫酸鈉，過濾，取濾液旋蒸 20 min，得到沙棘果油混合脂肪酸。按下式計(jì)算混 合脂肪酸得率。 混合脂肪酸得率 = 混合脂肪酸質(zhì)量 沙棘果油質(zhì)量 × 100% 

1． 2． 2 尿素包合法富集棕櫚油酸 

在三口燒瓶中加入一定量的 95% 乙醇及尿素， 在 80 ℃水浴鍋中攪拌回流 0． 5 h 至尿素完全溶解。 加入一定量的混合脂肪酸，繼續(xù)攪拌回流 1 h。待混 合溶液冷卻至室溫后置于一定溫度條件下包合不同 時(shí)間。然后在低溫條件下迅速抽濾，取濾液加入適 量石油醚，用 10% 鹽酸將 pH 調(diào)至 2 ～ 3，加入 50 mL 去離子水，倒入分液漏斗靜置、分層，水相再用石油 醚萃取，分液漏斗分離，合并兩次石油醚相，用 60 ℃ 去離子水洗至中性，再通過裝有無水硫酸鈉的漏斗， 在 60 ℃下將濾液旋蒸 20 min，得到包合后的混合脂 肪酸，稱重。按下式計(jì)算棕櫚油酸回收率。 棕櫚油酸回收率 = ( 產(chǎn)品質(zhì)量 × 產(chǎn)品中棕櫚油 酸含量) /( 沙棘果油混合脂肪酸質(zhì)量 × 棕櫚油酸含 量) × 100% 

1． 2． 3 脂肪酸組成及含量的測(cè)定 

采用 GB 5009． 168—2016 中三氟化硼法進(jìn)行甲酯化，采用氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定。色譜條件: CP － Sil 88 熔融石英毛細(xì)管柱( 50 m × 250 μm × 5 μm) ; 氫火焰離子檢測(cè)器，溫度 280 ℃ ; 升溫程序?yàn)槠鹗紲? 度 80 ℃，以 10 ℃ /min 升至 120 ℃，保持 2 min，再以 5 ℃ /min 升至 180 ℃，再以 2 ℃ /min 升至 206 ℃，再 以 25 ℃ /min 升至 230 ℃，保持 5 min; 載氣( H2 ) ，恒 壓模式下壓力 1． 02 × 105 Pa; 進(jìn)樣口溫度 250 ℃，進(jìn) 樣量 0． 2 μL; 分流比 75∶ 1。采用峰面積歸一化法進(jìn) 行定量。

2 結(jié)果與分析

沙棘果油共檢測(cè)出 8 種脂肪酸，其 中棕 櫚 酸、棕櫚油酸和油酸含量較高，分 別 為 30. 81% 、30． 74% 、31． 47% 。由沙棘果油制備的混 合脂肪酸得率為 73． 30%，棕櫚油酸含量為 30． 28%。隨著包合時(shí)間的延長，棕櫚油酸含 量和回收率呈現(xiàn)先升高后下降的規(guī)律，在包合時(shí)間 為 12 h 時(shí) 達(dá) 到 最 大 值，此時(shí)棕櫚油酸 含量為 53. 82% ，棕櫚油酸回收率為 29． 65% 。尿素包合是 一個(gè)包合和解包合的動(dòng)態(tài)平衡過程，隨著反應(yīng)時(shí)間的延長，反應(yīng)越充分，尿素與飽和脂肪酸的包合程度 越大，棕櫚油酸的含量也隨之升高。但包合超過 一定時(shí)間后，部分尿素會(huì)以晶體的形式析出，使得包 合過程趨向解包合的方向進(jìn)行，導(dǎo)致棕櫚油酸含量 下降。因此，選擇包合時(shí)間為 12 h。隨著包合溫度的升高，棕櫚油酸回 收率呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，棕櫚油酸含量開始升高，在 － 4 ℃時(shí)達(dá)到最大值 53． 82% 。隨著包合溫度的繼 續(xù)升高，棕櫚油酸含量降低。這是因?yàn)?，隨著溫度升 高，尿素的結(jié)晶量減少，被包合的棕櫚油酸的量減 少，從而濾液中棕櫚油酸含量也隨著升高。然而，溫 度過高不利于反應(yīng)向生成包合物的方向進(jìn)行，造成 未被包合的飽和脂肪酸量增加，導(dǎo)致棕櫚油酸含量 降低。綜合考慮，選取包合溫度 － 4 ℃為宜。

3 結(jié) 論 

通過單因素試驗(yàn)探討了包合時(shí)間、脲脂 比、包合溫度及醇脲比對(duì)富集沙棘果油中棕櫚油酸 的影 響，在此基礎(chǔ)上利用響應(yīng)面 Design － Expert 8. 0． 6 軟件對(duì)富集工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，得到的優(yōu)化 條件為包合時(shí)間 12 h、脲脂比 2． 5 ∶ 1、包合溫度 － 4 ℃ 及醇脲比 5∶ 1，該條件下富集沙棘果油中的棕 櫚油酸含量從 30． 28% 升高到 54． 80% ，回收率為 32. 46% 。

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